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内毒素是什么?

内毒素的化学成分是脂多糖,是革兰氏阴性菌细胞壁的主要组分之一。一个活的细菌很少释放内毒素,但死后可放出大量内毒素。

内毒素在血液中存在时会引起动物发热,是医疗注射液中最主要的。19 世纪 40 年代开始用注射溶液引起兔的发热反应实验来检测热原(主要是细菌内毒素)。 后来研究者发现鲎(一种海洋生物)血液遇到极微量的内毒素会发生凝血反应,从而在19 世纪 70 年代发明了鲎试剂用于快速精确检测内毒素。内毒素含量一般用国际单位( EU )来衡量,一般来说 1EU 大致等于 0.1-0.2ng。

由于内毒素会对很多种细胞产生刺激,影响实验结果,所以在实验中要尽量减少在培养液中的内毒素的来源。

由于生产工艺的提高,来自标准厂家的血清和培养液中的内毒素含量很少。所以现代实验室细胞培养中内毒素的来源主要是水、添加剂、细胞培养器皿等。

传统的玻璃仪器制备的双蒸水和通过离子交换柱、活性炭柱和超滤三个环节的纯水制备仪制备的超纯水都能满足细胞培养用水的要求。盛水器具上的细菌内毒素可能给超纯水带来污染。长时间放置的超纯水也可因盛水器具上细菌生长而污染细菌内毒素。

内毒素能紧密的粘在玻璃器皿上,实验室里用普通的方法不能完全的消除除内毒素。用 250 ℃, 30 分钟或 180 ℃, 2 小时干热灭菌能完全除掉玻璃器皿上的内毒素。

一次性塑料器皿经过高温注塑成型,没有内毒素存在。但在处理、包装等生产过程中,可能污染内毒素。杭州生友生物技术有限公司生产的一次性细胞培养皿和培养板等在万级无尘车间生产和包装,产品的内毒素含量低于 0.5EU/ml。