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怎样化冻动物细胞 ?

化冻过程的原则是要让冻存的细胞快速融化。

如果细胞储存在液氮液面下,使用者最好准备好必要的防护器具(至少要戴上护目镜,最好戴上面罩和较厚的手套),防止进入冻存管的液氮骤然膨胀引起爆炸而造成伤害。从冰箱或液氮罐取出细胞后将冻存管放 37℃水浴轻轻晃动使之化冻完全,注意不要让水浸到盖子以防污染发生。

由于大多防冻剂与细胞长时间接触时对细胞有毒害,所以最好尽快除去细胞冻存时加入的防冻剂。

防冻剂的去除方式和细胞的敏感性有关。有些细胞在某些防冻剂存在的条件下能很好的贴壁生长,可以直接将化冻的冻存细胞连同其冻存液加入预备好 15-20ml 培养液的细胞培养瓶或培养皿中,轻轻混匀后放入培养箱培养过夜后换培养液。

对于敏感细胞要加入 10ml 培养液中, 100xg 离心 5 分,去上清后加培养液轻轻重悬细胞,加入培养器皿后在培养箱培养,第二天更换培养液。